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    冰凍切片Kat1抗原免疫組化染色試劑盒的操作步驟

    發表時間:2022-03-03  |  點擊率:246
     
      冰凍切片Kat1抗原免疫組化染色試劑盒的原理很簡單,蘇木素染色法也是常用的一種染色方法。木素染色后的細胞核呈現藍色,細胞漿呈現粉紅色或紅色。染色液也可以重復使用,直至認為效果不佳時再換用新的染色液。
     
      冰凍切片Kat1抗原免疫組化染色試劑盒的操作步驟:
     
      1、準備:從冰箱取出小鼠核因子κB受體活化因子配基試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。
     
      2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
     
      3、加標準品和待測樣本:取足夠數量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。
     
      4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
     
      5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
     
      6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。
     
      7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
     
      8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。
     
      9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。
     
      10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。
     
      11、測定:以空白孔調零,在終止后15分鐘內,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
     
      12、冰凍切片Kat1抗原免疫組化染色試劑盒計算:根據標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算,zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
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